ISOLASI PROTEIN DAN
ANALISIS PROFIL PITA PROTEIN DENGAN METODE
LOWRY DAN SDS-PAGE
drh. Rr. Bhintarti Suryo Hastari, M.
Biomed1) Maulana Malik Assayiddin2), Puri Dwi Nurmaulida
2), Fuzi Muchlissoh3),
Muhammad Faiz3), Mutia Afifah3), Ratna Lestyana D.3)
, Rizky Hastuti P.3
1)Dosen
Praktikum Biologi Molekular; 2)Asisten Dosen Praktikum Biologi
Molekular; 3)Praktikan
Program Studi
Biologi Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Syarif
Hidayatullah Jakarta
Abstrak
Protein
adalah biomakromolekul polipeptida yang tersusun dari sejumlah L-asam amino
yang dihubungkan oleh ikatan peptida. Praktikum ini bertujuan untuk dapat
melakukan isolasi protein, menentukan kadar protein pada sampel tertentu, dapat
menganalisis masing-masing profil pita protein dari tiap sampel dan mengetahui
nilai mobilitas relatif (Rf). Sampel protein dibagi ke dalam 6 kelompok (S1,S2,
S3, S4, U1, dan S6). Isolasi dan penetapan
kadar protein dengan metode Lowry dan analisis profil pita protein melalui
teknik SDS-PAGE pada gel poliakrilamid 12,5% terhadap sampel A4. Larutan
standar yang digunakan adalah Bovine Serum Albumin (BSA) pada panjang gelombang (l) 774 nm. Hasil
persamaan linear kurva standar adalah y= 0,0018x + 0,0097 dengan nilai R =
0,9887. Kadar protein pada sampel S1 (41,63%), S2 (39,35%),
S3 (16,92%), S4 (0,55%), U1 (-1,66%), dan S6
(0,98%). Pita protein pada sampel A4 dengan BM 45 kDa memperlihatkan
intensitas warna yang paling jelas dan paling tebal, sehingga dapat digunakan
sebagai acuan bagi sampel yang memiliki BM di bawah 45 kDa. Pita-pita protein
dengan BM di bawah 45 kDa berada pada urutan ke-1 sampai ke-3 dari bawah. Berdasarkan
keadaan tersebut maka diperoleh lima pita yang digunakan untuk menentukan BM
protein pada tiap sampel. Nilai Rf dari sampel A4 berada pada
kisaran 0,06-0,44 yang menunjukkan bahwa hasil pemisahan protein berlangsung
baik.
Kata kunci : Kadar protein, Metode Lowry, Profil protein, SDS-PAGE